美国南加利福尼亚大学

Preet M. Chaudhary教授访谈

　　目前，CAR-T最热的治疗靶点为CD19，CD19特异性CAR-T主要应用于B细胞系急性淋巴细胞白血病以及淋巴瘤的治疗，也正处于大量的临床试验当中。其中，绝大部分的CARs(嵌合抗原受体）来自于鼠单链抗体，因此将其应用于人体时便会诱发一系列免疫排斥反应，从而限制了其临床应用。

　　Chaudhary教授报告的这项研究在FMC-63鼠单链抗体的基础上形成FMC-63 CAR，并与慢病毒载体结合进行克隆增殖；将2条人源化的CD19单链抗体序列代替FMC-63序列进而形成人源化CD19特异性CAR。然后分别以鼠单链抗体FMC-63 CAR及人源化CD19特异性CAR去转染T细胞、NK92MI细胞以及JNG细胞。结果发现，转染后两种CAR的表达率基本相同。再以稳定表达两种CAR的JNG细胞与CD19阳性的Raji（Burkitt淋巴瘤）、Nalm6（前B细胞急淋）以及Bv173（慢粒）细胞系进行共培养。共培养后，这些细胞系的GFP、CD69为强表达，IL-2水平上升，而在未进行上述2种CAR转染的JNG细胞并无以上效应。

　　此外，分别将稳定表达FMC-63 CAR、人源化CD19特异性CAR以及对照性CAR的NKMI细胞系进行细胞毒实验分析。发现：表达FMC-63CAR和人源化特异性CAR的NKMI细胞能够靶向性杀灭CD19阳性的肿瘤细胞，而对CD19阴性的肿瘤细胞无任何作用。

　　同样，将稳定表达FMC-63 CAR以及人源化CD19特异性CAR的NKMI细胞直接与B系急淋患者、急髓白血病患者的细胞进行共培养。结果发现，以上2种CAR可靶向性杀灭B系急淋患者的CD19阳性细胞，但对于CD19阴性以及急性髓系白血病患者的细胞却无杀灭作用。

　　Chaudhary教授表示：“通过这个研究，我们发现不论是针对细胞系还是患者细胞标本，人源化CD19特异性CAR对于CD19阳性的肿瘤细胞的靶向性杀灭效应与FMC-63CAR基本相同，但同时又能避免免疫排斥反应的发生。”